Column Verificatie Technieken in HPLC

High-performance vloeistofchromatografie ( HPLC ) is een waardevol instrument voor de moderne organische chemici , omdat het hen in staat stelt niet alleen om een ​​mengsel te scheiden in zijn componenten , maar ook om te kwantificeren hoeveel van elk aanwezig is . Hoewel HPLC apparaten zijn geavanceerde instrumenten , kunnen hun prestaties geleidelijk verslechteren in de tijd . Om ervoor te zorgen dat ze goed functioneren en het leveren van betrouwbare resultaten , is het belangrijk om hun prestaties periodiek te controleren. Flow Rate &
Druk

De pomp moet in staat zijn om nauwkeurige opbrengsten te behouden . Het testen van de stroomsnelheid is heel eenvoudig en slechts inhoudt het meten van de hoeveelheid tijd die nodig is om een willekeurig gekozen oplosmiddel verzamelen uit de kolom bij verschillende stroomsnelheid instellingen . Druk pomp kan worden getest door de stekker van de pomp met een dode - moer en het aansluiten van een recorder aan de pomp - kop druk te meten . De druk moet snel stijgen tot ongeveer 3000 pond per vierkante inch ( PSI ) , dan stijgen meer geleidelijk naar een hogere druk , waarna de pomp automatisch uitgeschakeld . Als de druk schommelt 3000 PSI of snel af nadat de pomp wordt uitgeschakeld , is het meestal impliceert een storing , als een lek in het systeem .
Gradient

De pomp moet ook nauwkeurig variëren van de samenstelling van het oplosmiddel of mobiele fase , waarbij elutie of spoelen van de kolom toenemende polaire verbindingen als percentage van de minder polaire oplosmiddel toeneemt . Gradient nauwkeurigheid getest met twee kanalen tegelijk , een van hen verstrekken zuiver oplosmiddel en anderzijds een oplosmiddel met een opgeloste chemische tracer , zoals cafeïne . Als de concentratie van de tweede oplossing toeneemt , kunt u de ultraviolette ( UV) van de kolom uitvoer meten en deze gegevens gebruiken om gradiënt juistheid controleren .
Injector Module

precisie De injector module kan getest worden door uitvoeren van zes herhaalde injecties met een monster ; significante verschillen in de resultaten suggereren heb je een probleem . Sommige experimenten betrekken variabele injectie volumes , dus het is ook belangrijk om het vermogen van de injector om de juiste hoeveelheid monster trekken testen. Door het uitvoeren van injecties in het 0 tot 100 microliter bereik , kan een chemicus verkrijgen en plot gegevens en stelt de correlatie tussen de resultaten en de monsterconcentratie . Een zwakke correlatie suggereert een storing .
Detectormodule

De detector module registers absorptie voor opgeloste stof en oplosmiddel eluerende of voortvloeien uit de bodem van de kolom , dus de nauwkeurigheid is vooral van belang om te zorgen voor goede resultaten. Veel HPLC instrumenten omvatten ingebouwde golflengte verificatievermogen te zorgen voor de golflengte van de detector gebruikt is dezelfde als degene die je hebt geselecteerd. Een andere test gaat met behulp van een reeks monsters dat een toenemende concentratie van een verbinding zoals cafeïne bevatten . De apotheker kan dan de resultaten worden ten opzichte van de testoplossing concentratie en bepalen de sterkte van het verband . Een zwakke correlatie suggereert een storing .