Hoe worden Antilichamen Gemeten
? Antilichamen immuun eiwitten genaamd immunoglobulinen die worden geproduceerd in reactie op de detectie van een vreemd voorwerp of antigeen , zoals bacteriën , virussen of kankercellen . Er zijn vijf belangrijke soorten van immunoglobulinen in het lichaam : IgA , IgG , IgM , IgE en IgD . Voor elk soort van antilichaam gemeten testen en behandelen van kanker of infectieziekten . Er zijn verschillende soorten methoden om antilichamen voor onderzoekers of medische behoeften meten. Enzyme - linked immunosorbent assay
Enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) wordt gebruikt om de hoeveelheid antilichaam of de hoeveelheid eiwit gebonden aan antilichaam in een bloed monster. De test gebruikt interactie antigeen /antilichaam , waarbij het antigeen en antilichaam complexen . Het antigeen of antilichaam in het monster zijn gelabeld met een enzym . Nadat het antigeen en antistof complexen vormen ze kunnen worden gedetecteerd op een ELISA-plaat . Het enzym op het complex reageert met een substraat een gekleurd product dat kan worden gerekend op een plaatteller om de hoeveelheid antilichamen in het monster bepalen vormen .
Western Blot
De Western Blot techniek wordt gebruikt om zowel het molecuulgewicht van antilichamen en de relatieve hoeveelheden van antilichamen aanwezig in een monster te bepalen . Western blot technieken gelelektroforese om de antilichamen te scheiden . De antilichamen worden overgebracht naar een nitrocellulose vel en geïncubeerd met generieke eiwitten . Een oplossing met enzymen wordt toegevoegd om te binden aan specifieke antilichamen . Substraat wordt toegevoegd en de antilichamen geïncubeerd met het antilichaam /enzym -complexen omzetten in een gekleurd product dat kan worden bekeken en gefotografeerd om de hoeveelheid aanwezige antilichamen te bepalen .
Fluorescentie flowcytometrie
fluorescentie flow cytometrie is een techniek die in staat is antilichamen te tellen door het meten van de cellulaire en fluorescerende eigenschappen van antilichamen . Een laser gaat door de cellen en de metingen worden bepaald door veranderingen in lichtverstrooiing , lichtabsorptie en lichtemissie , als het door detectoren in het monster passeert . Het resulterende licht verandert worden overgebracht naar een computer softwareprogramma en gemanipuleerd in digitale signalen die worden weergegeven in een grafiek om specifieke celtellingen voor verschillende soorten cellen , zoals antilichamen .
Hemocytometer
celtellingen op antilichamen kunnen worden uitgevoerd met behulp van een hemocytometer . Een bloedmonster wordt bereid in een Eppendorf buis met behulp van een pipet . Trypan blauwe oplossing wordt toegevoegd aan de oplossing om dode cellen en het mengsel markeren de hemocytometer toegevoegde . De haemocytometer bevat een raster waarin de cel tellingen worden gemaakt met behulp van een hand tally terwijl u de rasterlijnen onder 10X kracht van een samengestelde microscoop .
->:
<-: