Verschil tussen Noord & amp ; Southern blotting

Biologie is een uitdaging voor vele redenen . Een van die redenen is de moeilijkheid bij het ​​bestuderen van macromoleculen --- moleculen die honderden of duizenden kleinere moleculaire eenheden aan elkaar geregen . Als slechts een of twee van de kleinere moleculaire eenheden worden geruild , de macromoleculen veranderen hun eigenschappen . Biologen moet ergens zeer kleine veranderingen in een groot molecuul te meten . Natuurlijk , " groot " betekent niet groot genoeg om te behandelen of te zien , zodat biologen hebben materiaal nodig om dergelijke metingen te verrichten. Deppen is een van die instrumenten . Gelelektroforese

Alle blotting technieken beginnen met gel- elektroforese . De gel is min of meer als een dunne rechthoek gelatine . Een kleine hoeveelheid van een speciaal bereide biologische moleculen wordt op de gel aan een uiteinde , wordt een elektrisch veld wordt van de ene naar de andere . De bereide moleculen zijn elektrisch geladen , zodat het elektrische veld trekt ze door de gel . Ze bewegen langzaam door de dichte gel tot het veld is uitgeschakeld . De lichtere moleculen raken sneller getrokken en bewegen verder , de zwaardere moleculen langer duren om dit te verplaatsen ze het niet zo ver .
Behulp Gels

In de praktijk verschillende monsters worden neergezet verspreid langs een rand van de gel . Nadat het elektrische veld wordt aangelegd , de verschillende monsters verspreid richting de tegengestelde rand van de gel . De verspreiding van elk monster wordt een " lane . " De baan zal gewoonlijk een paar verschillende banden die corresponderen met moleculen van verschillende gewichten bij elk monster . Er zijn verschillende manieren om de banden zichtbaar . Het analyseren van de gel geeft biologen een idee van de grootte van de moleculen , maar meer informatie is een andere methode nodig . Dat is waar blotting komt .
Blotting

Blot is een manier van het nemen van de moleculen die uit elkaar zijn verspreid in de gel en maakt ze beschikbaar voor meer analyse . Op dezelfde manier vloeipapier opzuigt losse inkt --- of deed in de dagen dat mensen gebruikt vulpennen --- biologische blotting " zuigt " de moleculen van de gel in een ander materiaal . De moleculen eindigen in hetzelfde patroon , maar nu in een speciaal papier of kunststoffolie . De moleculen krijgen gebonden aan de plaat , zodat ze niet meer bewegen en dan kunnen ze worden geweekt in een oplossing van andere probe moleculen die meer informaties moleculen . Er zijn verschillende manieren om die stappen , maar het principe is hetzelfde voor hen allen .
Zuid , Noord en West- blotting

Bioloog Edwin Southern was de eerst een blotting techniek ontwikkelen. Hij ontwikkelde al de gegevens die nodig zijn om erop te vertrouwen dat DNA gelelektroforese nauwkeurig kan worden overgedragen en gemeten in deppen materiaal. Die methode werd naar hem vernoemd : Southern blotting . Andere wetenschappers bedacht hoe dezelfde algemene techniek te laten werken voor RNA , en --- in de typische wetenschapper stijl fun -loving --- noemden hun gedetailleerde methode Northern blotting . Later werd de procedure aangepast voor het meten eiwitten en werd Western Blotting genoemd . Alle drie de technieken maken gebruik van dezelfde principes : . Southern maatregelen DNA , Noord- maatregelen RNA , West- maatregelen eiwitten